在慢性疼痛机制研究与神经药物测试中，背根神经节（DRG）如同揭开神经奥秘的 “钥匙”。精准的 DRG 原位注射和神经节取材技术，是科研人员探索神经信号传导的核心技能。今天为大家拆解这套高难度实验操作，附详细步骤与避坑指南，建议收藏！
1. 麻醉与固定
2. 定位与暴露
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沿着背部正中线切开皮肤，接着分离肌肉。
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仔细咬除目标节段（像 L4、L5）的椎板，使硬脊膜以及下方呈晶莹珠状的 DRG 暴露出来。
3. 镜下精准注射
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在体视显微镜下开展操作，用精细镊子轻轻提起或者稳定 DRG 周围的组织。
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选用微量注射器或者胰岛素针。
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让针尖小心刺入 DRG 包膜，缓慢且稳定地注入预定体积的溶液（一般为 nL-μL 级）。
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要避免过度牵拉、刺穿神经根以及注射速度过快，以防造成组织损伤或者溶液外溢。
4. 缝合与恢复
仔细缝合肌肉层和皮肤，为动物做好保暖措施助其复苏，同时密切监测动物状况。
（切除椎板时需注意勿损伤脊髓以及神经束）
从暴露到保存的黄金流程
1. 麻醉与固定
2. 充分暴露椎管
3. 精细分离与摘取
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在显微镜下，使用精细镊子和剪刀：
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轻柔地分离 DRG 周围的硬膜、脂肪以及结缔组织。
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清晰辨别与 DRG 相连的背根（感觉根，向脊髓延伸）和脊神经（向外周延伸）。
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在靠近 DRG 本体的位置切断背根和脊神经。
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用镊子轻轻夹住神经残端或者 DRG 包膜（避免挤压胞体），将完整的 DRG 取出。
4. 即刻处理
取材之后，立即根据实验目的进行处理。例如，若用于 RNA / 蛋白研究，可将其速冻于液氮中；若用于形态学研究，可将其固定于多聚甲醛（PFA）中。
以下附上大小鼠神经节取材图片以及体视镜下神经节大体图片
如图中所示，能明显观察到神经束上有一处膨大组织（神经节）
🚦 避坑指南：资深科研人员的血泪经验
1. 注射失败补救方法
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针头堵塞：将针退回 5nL，然后再推进，利用压力冲开堵塞物。 -
位置偏移：注射器接荧光染料（如 Fast Blue），在紫外灯下确认染料分布情况。
2. 保障取材完整性
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在 DRG 下方垫上湿润的滤纸片，防止发生粘连。 -
遇到粘连性结缔组织时，滴加胶原酶 IV（1mg/ml），孵育 2 分钟后再进行分离。
3. 提高术后生存率
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在椎板缺损的位置覆盖可吸收明胶海绵。 -
术后连续 3 天皮下注射美洛昔康（5mg/kg）和恩诺沙星（10mg/kg）。
本文整理自实验手册，实操需严格遵循动物伦理规范及实验室安全准则。
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作者 | 袁洪森
排版 | 翁小云
统筹制作 | 深圳灵赋拓普生物科技有限公司
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