别藻蓝蛋白(Allophycocyanin ,APC，以下简称APC)是一种从红藻中提纯的高亮度藻胆蛋白分子量104kDa，属于远红色荧光，具有很高的量子产量。激光594 nm和633 nm处激发其发光，在650 nm处吸收峰最大，在660 nm处荧光发射峰最大。APC比普通的化学发光强100倍，在普通应用中，其至少可以提高灵敏度5-10倍，主要用于流式细胞术、微阵列分析、ELISAs等。APC主要优点是发射长波荧光，抗淬灭性强，高水溶性，均质结构，分子量确定。
基本原理：
利用抗体和APC上游离的氨基，采用定向对接偶联技术将抗体分子与APC共价偶联，
别藻蓝蛋白标记抗体
1).抗体的修饰
a. 取待标记抗体（纯度>90%），用标记缓冲液（0.1M PBS pH 7.2）调整到 2mg/ml左右为宜，按照每mg抗体加入一定量抗体修饰试剂溶液，轻轻混匀，在室温下避光搅拌反应 90分钟；【如果抗体量太少，抗体修饰试剂溶液加入量不少于0.5ul】
b. 反应完毕后，将其转入30K MWCO超滤管，用标记缓冲液超滤5-10次（每次12000rpm 1min），每次管芯内液体体积不超过原体积1/4为宜，最后一次超滤完成，管芯内液体即为修饰的抗体。
2).活化APC蛋白与抗体偶联
a. 将修饰抗体与活化APC蛋白溶液混合（每1mg修饰抗体对应62.5ul活化APC溶液），室温避光反应1小时；
b. 标记好的抗体分装，加入适当保护剂，-20℃保存备用。
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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ARL0023K-1 |
别藻蓝蛋白抗体快速标记试剂盒 |
0.5mg |
别藻蓝蛋白抗体快速标记试剂盒